冷冻保护剂对于精子冷冻保存的意义

2019年2月14日09:34:08 发表评论 222 views

男性精子冷冻保存时,常常会用到冷冻保护剂的主要作用是降低冷冻和复苏过程中细胞的渗透性损伤和细胞内冰晶的形成,主要包括渗透性保护剂和非渗透性保护剂两大类,非渗透性保护剂如蔗糖、聚蔗糖、海藻糖等大分子物质不能进入细胞内,只能为细胞外液提供高渗环境,促使细胞逐步脱水,渗透性保护剂如甘油、乙二醇、二甲基亚峰等小分子物质可按细胞膜两侧溶液电解质的溶度有高向低进行跨膜转运。在细胞逐步脱水过程中,细胞外高溶度的渗透性保护剂进入细胞内,可降低细胞内外的渗透压差,减缓细胞内水分渗出导致的细胞皱缩和体积变化,减轻细胞膜和细胞骨架的损伤,渗透性保护剂与非渗透性冷冻保护剂联合应用可提高冷冻保护的效果。

冷冻保护剂对于精子冷冻保存的意义

冷冻保护剂的溶度可对溶液的渗透性,黏度以及冰点的下降起关键作用,但是溶度越高对细胞的毒性作用越大,例如高溶度的DMSO可诱发蛋白变性以及能降低对细胞的渗透性损伤和毒性作用又能获得良好的复苏率。因此寻找玻璃化冷冻过程中对细胞损伤最小的保护剂以及最近溶度至关重要。

有专家较早的进行了无冷冻保护剂的精子冷冻研究,少弱精子症患者射出的精子经过上游法处理后,直接将40~100ul样本置于冷冻载体上进行玻璃化冷冻,解冻后复苏率为15%-20%,相关结果也证实,无冷冻保护剂的玻璃化冷冻是可行的,不但可以减少冷冻保护剂对细胞的损伤,还可以减少冷冻时机和步骤,并有利于时机操作和临床应用。

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